Mikobakteri dan Nocardia

Mikobakteri dan Nocardia

   Konsep Umum

         Mycobacterium tuberculosis Complex

         Mycobacterium tuberculosis, M bovis

         Manifestasi klinis

Tuberkulosis terutama pada sistem pernapasan bagian bawah  ditandai oleh batuk produktif kronis, demam ringan, keringat malam, dan penurunan berat badan.

TB laten dan TBC aktif

Apa infeksi TB laten?
Pada kebanyakan orang yang menghirup bakteri TB dan menjadi terinfeksi, tubuh mampu melawan bakteri untuk menghentikan pertumbuhn mereka. Bakteri menjadi tidak aktif, tetapi mereka tetap hidup dalam tubuh dan kelak dapat menjadi aktif. Ini disebut infeksi laten TB .   Orang-orang dengan infeksi TB laten

tidak memiliki gejala
tidak merasa sakit
tidak dapat menyebarkan TB kepada orang lain
biasanya memiliki reaksi kulit tes positif
dapat mengembangkan penyakit TB aktif jika mereka tidak menerima pengobatan untuk infeksi TB laten

Banyak orang yang memiliki infeksi laten TB tidak pernah mengalami penyakit TBC aktif. Pada orang-orang ini, bakteri TB tetap aktif untuk seumur hidup tanpa menyebabkan penyakit. Tetapi pada orang lain, terutama orang-orang yang memiliki sistem kekebalan tubuh yang lemah, bakteri TB menjadi penyebab penyakit dan aktif.

Apakah penyakit TBC aktif?
bakteri TBC menjadi aktif jika sistem kekebalan tidak bisa menghentikan mereka. Bakteri aktif mulai berkembang biak dalam tubuh dan menyebabkan penyakit TBC aktif. Bakteri menyerang tubuh dan menghancurkan jaringan. Jika hal ini terjadi di paru-paru, bakteri sebenarnya dapat membuat lubang di paru-paru. Beberapa orang  menderita penyakit TB aktif segera setelah terinfeksi, sebelum sistem kekebalan tubuh mereka dapat melawan bakteri TBC. 

Bayi dan anak-anak muda sering memiliki sistem kekebalan tubuh lemah. Orang yang terinfeksi HIV, virus penyebab AIDS, memiliki sistem kekebalan sangat lemah. Orang  juga dapat memiliki sistem kekebalan tubuh lemah, terutama pada:

penyalahgunaan obat
diabetes mellitus
silikosis
kanker kepala atau leher
leukemia atau penyakit Hodgkin's 

penyakit ginjal parah
berat badan rendah
perawatan medis tertentu (seperti pengobatan kortikosteroid atau transplantasi organ)
pengobatan untuk rheumatoid arthritis atau penyakit Crohn's

Gejala TB tergantung pada tempat di dalam tubuh dimana bakteri TB tumbuh.  Bakteri TB biasanya tumbuh di paru-paru.   TBC di paru-paru dapat menyebabkan gejala seperti

batuk   yang berlangsung 3 minggu atau lebih
nyeri di dada
batuk darah atau dahak (lendir yang berasal dari dalam paru-paru)

Gejala lain dari penyakit TBC aktif
kelemahan atau kelelahan
berat badan turun
tidak ada nafsu makan
panas dingin
demam
berkeringat di malam hari

 tes  Kulit   
Tes kulit TBC dapat digunakan untuk mengetahui jika Anda memiliki infeksi TB. Anda bisa mendapatkan tes kulit pada setiap laboratorium patologi. Seorang teknisi akan menyuntikkan sejumlah kecil pengujian cairan (disebut tuberkulin  atau PPD) tepat di bawah kulit pada sisi bawah lengan bawah. Setelah 48 jam, Anda harus kembali   untuk melihat hasil tes kulit Anda, dibaca oleh teknisi laboratorium. Anda mungkin mengalami pembengkakan di mana tuberkulin itu disuntikkan. Teknisi akan mengukur pembengkakan ini dan memberitahu Anda jika reaksi  positif atau negatif. Reaksi positif  berarti bahwa Anda telah terinfeksi oleh orang dengan penyakit TBC aktif.

Jika Anda baru saja menghabiskan waktu bersama dan telah terkena seseorang dengan penyakit TBC aktif,   reaksi tes TB   mungkin  belum positif  . Anda mungkin perlu melakukan tes kulit kedua 8 sampai 10 minggu kemudian. Hal ini karena  sistem kekebalan tubuh pwerlu waktu untuk bereaksi terhadap tes kulit TB. Jika reaksi Anda pada tes kedua masih negatif, Anda mungkin tidak memiliki infeksi laten TB.

Quantiferon ®-TB Gold
Quantiferon ®-TB Gold (QFT) adalah tes darah yang dipakai untuk mengetahui apakah Anda terinfeksi bakteri TB. The QFT mengukur respon terhadap protein TB ketika mereka dicampur dengan sejumlah kecil darah. Saat ini, beberapa laboratorium menawarkan QFT itu. Jika laboratorium Anda memang menawarkan QFT, hanya satu kali kunjungan diperlukan, pada saat darah diambil untuk ujian.

Bagaimana jika hasil  tes positif untuk TB?
Jika Anda memiliki reaksi positif terhadap tes kulit TB atau QFT, dokter Anda mungkin melakukan tes lain untuk melihat apakah Anda memiliki penyakit TBC aktif. Tes-tes ini biasanya termasuk x-ray dada dan tes dahak. Karena bakteri TB dapat ditemukan di tempat lain selain paru-paru Anda, dokter Anda dapat memeriksa darah atau air seni, atau melakukan tes lainnya. Jika Anda memiliki penyakit TBC aktif, Anda   perlu meminum obat untuk menyembuhkan penyakit.

Profil tes Tuberkulosis (TB)   
Hitung Darah Lengkap
ESR
Adenosin Deaminase
Mantoux Test
Chest X Ray
Sputum AFB

Struktur

Genus Mikobakteri, sel berbentuk batang yang ramping, melengkung   dan tahan terhadap asam, alkali, dan dehidrasi. Dinding sel mengandung wax kompleks dan glikolipid. Pertumbuhan pada media yang diperkaya sangat lambat, membelah diri dalam 18 hingga 24 jam; isolat klinis mungkin memerlukan waktu 4 sampai 6 minggu untuk tumbuh membentuk koloni.

Klasifikasi dan Sifat antigenik  

Berdasarkan tingkat pertumbuhan, katalase dan produksi niasin, dan pigmentasi dalam terang atau gelap, mikobakteri diklasifikasikan atas Mycobacterium tuberculosis kompleks (M tuberkulosis, M bovis, M africanum, M microtii) dan spesies nontuberculous. Teknologi Probe- gen   sekarang banyak digunakan untuk klasifikasi ini.

 .

Patogenesis

Mycobacterium tuberculosis   masuk ke alveoli melalui transmisi udara. Mereka kebal terhadap makrofag alveolar dan menggandakan dirinya, membentuk lesi primer atau tuberkulum; mereka kemudian menyebar ke kelenjar getah bening regional, masuk ke sirkulasi, dan berdiam di paru-paru. Kerusakan jaringan terjadi akibat reaksi hipersensitivitas yang diperantarai sel (cell mediated immune).

Pertahanan Host

Kerentanan dipengaruhi oleh faktor-faktor genetik dan etnis. Resistensi diperantarai oleh limfosit T, makrofag yang terinfeksi melisiskan secara langsung atau mengaktifkan mereka melalui mediator larut (misalnya, gamma interferon) untuk menghancurkan basil intraseluler; antibodi tidak memainkan peran sebagai pelindung.

Epidemiologi

M tuberkulosis dapat menular, tetapi hanya 5-10 persen dari orang normal  terinfeksi penyakit aktif. TB   paling umum pada orang tua, miskin, kurang gizi, atau immunocompromised, terutama orang yang terinfeksi dengan human immunodeficiency virus (HIV).  Infeksi persisten  dapat mengaktifkan kembali setelah puluhan tahun karena penurunan status kekebalan; reinfeksi eksogen  juga dapat terjadi.

Diagnosis

Recent infeksi M tuberculosis menghasilkan konversi Mantoux positif untuk tes kulit dengan protein derivatif dimurnikan (PPD). Sebuah diagnosis penyakit aktif didasarkan pada manifestasi klinis, sinar rentgen dada yang abnormal, pewarnaan bakteri tahan asam  pada spesimen dahak atau bronchoscopic   dan kultur organisme.  Tes amplifikasi gen Mycobacterial dari spesimen klinis saat ini sudah banyak dilakukan.

Perawatan dan Kontrol

Terapi terdiri dari 6-9 bulan saja dengan isoniazid, rifampisin, Pyrazinamide dan ethambutol. Obat tambahan dapat digunakan jika resistensi obat dicurigai (misalnya, infeksi di Asia Tenggara imigran atau di daerah di mana wabah TBC resistan terhadap obat). Jika pasien HIV-positif, dianjurkan pengobatan lebih lama (9-12 bulan). PPD konversi tanpa tanda-tanda atau gejala lainnya dapat menjamin profilaksis terapi isoniazid   selama 6 bulan. Vaksin BCG M bovis   digunakan di lebih dari 120 negara, terutama di populasi berisiko tinggi meskipun keefektifannya masih kontroversial,       

Nontuberculous mikobakteri

Manifestasi klinis

Pasien menunjukkan penyakit pernapasan yang lebih rendah mirip dengan tuberkulosis (M kansasii, M avium-intracellulare),   limfadenitis leher rahim (M scrofulaceum), infeksi kulit dan   jaringan lunak (M ulcerans, M marinum), atau penyakit yang disebarkan orang terinfeksi HIV.

Struktur

Nontuberculous mikobakteri mirip mikobakteri lainnya. Pembelahan selnya serupa dengan mikobakteri lain, kecuali untuk strain yang dapat tumbuh dengan cepat (misalnya M. fortuitum).

Klasifikasi dan antigenik Jenis

Nontuberculous mikobakteri diklasifikasikan berdasar pigmentasi dalam terang atau gelap dan   tingkat pertumbuhannya. Beberapa spesies mengandung banyak serotipe, berdasarkan lipooligosaccharides atau peptidoglycolipids.

Patogenesis

Patogenesis mirip dengan mikobakteri lainnya. Mungkin ada pembentukan Granuloma   dan hipersensitivitas lambat.

Host Pertahanan

Pertahanan host mirip dengan mikobakteri lainnya.  Diperantarai oleh sel kekebalan.

Epidemiologi

Infeksi ini tidak ditularkan antar manusia, tetapi diperoleh dari sumber-sumber alam (misalnya, tanah dan air). Mikobakteri Nontuberculous adalah patogen oportunis yang berhubungan dengan kekebalan pasien (misalnya, pasien terinfeksi HIV).

Diagnosis

 Memerlukan diagnosis dan identifikasi biakan/kultur.

Pengobatan

Banyak dari mikobakteri yang resisten terhadap obat-obatan antituberculosis yang biasa digunakan. Oleh karena itu,   sering diperlukan obat yang berbeda.  Reseksi bedah   kadang-kadang diperlukan. Tidak ada vaksin yang tersedia.

Mycobacterium leprae

Manifestasi klinis

Kusta adalah infeksi kulit, saraf perifer, dan selaput lendir, yang menyebabkan lesi, hypopigmentation, dan kehilangan sensasi (anestesi), khususnya di daerah-daerah yang lebih dingin dari tubuh.

Struktur

Mycobacterium leprae adalah serupa dengan mikobakteri lainnya; dinding sel mengandung glikolipid phenolic unik. Tidak dapat dibiakkan secara in vitro: karena berkembang biak sangat lambat in vivo (Waktu penggandaan 12-hari  ).

Klasifikasi dan antigenik Jenis

Semua isolat dari  M leprae, baik humanus dan sylvatic, tampaknya   mempunyai homologi DNA sama.

Patogenesis

Spektrum kusta (penyakit Hansen) terdiri dari lepromatosa (tersebar, multibacillary, dengan hilangnya sel  Kekebalan spesifik) dan tuberculoid (lokal, paucibacillary, dengan kuat diperantarai sel imunitas).

Host Pertahanan

Pertahanan host mirip dengan upaya melawan mikobakteri lainnya.

Epidemiologi

Memerlukan transmisi berkepanjangan dan  kontak langsung melalui kulit utuh, selaput lendir, atau luka tembus.  

Diagnosis

Diagnosis  didasarkan  pada pewarnaan tahan asam  dan  pemeriksaan  sitologi  kulit yang terkena dan  respon kulit   terhadap tes lepromin; M leprae tidak dapat dibiakkan.

Perawatan

Pengobatan (termasuk profilaksis di daerah kontak) dengan terapi multi-obat atau MDT (dapson, rifampin, dan clofazimine) dilakukan pada pasien rawat jalan selama 3 sampai 5 tahun; vaksinasi dengan BCG  M bovis  terlihat efektif di beberapa daerah endemik.

Nocardia

Manifestasi klinis

Manifestasi yang paling umum dari infeksi nocardial radang paru-paru : demam, penurunan berat badan, batuk, nyeri dada berhubung dgn selaput dada, dan dyspnea. Pada sekitar 20 persen pasien ada lesi kulit granulomatosa dan / atau kelainan sistem saraf pusat.

Struktur

Bakteri Gram-positif, sebagian kecil batang tahan asam,  tumbuh lambat membentuk rantai bercabang   mirip hyphae jamur.

Klasifikasi dan Jenis antigenik   

Tiga spesies menyebabkan infeksi pada manusia: N asteroides, N brasiliensis, dan N caviae. Ini dibedakan oleh proteolitik dan pola fermentasi dalam biakan

.

Patogenesis

Infeksi adalah dengan menghirup udara mengandung basil dari sumber lingkungan (tanah atau bahan organik); penyakit tidak menular. Lesi kulit yang disebabkan oleh N brasiliensis sering akibat kontak langsung. Nocardia merongrong mekanisme phagocytes antimikroba,     jarang menyebabkan pembentukan  abses atau Granuloma   dengan penyebaran limfatik hematogenous   pada kulit atau sistem saraf pusat. Angka kematian mencapai 45 persen bahkan dengan terapi.

Host Pertahanan

Ketahanan alami terhadap infeksi tinggi dalam individu normal, dan penyakit ini biasanya berhubungan dengan disfungsi kekebalan selular, kekurangan imunoglobulin atau cacat Leukocyte.  Resistensi   kompleks diperlukan,   melibatkan pengaktifan makrofag, sel T sitotoksik, dan neutrofil inhibition.

Epidemiologi

Nocardiosis jarang pada orang normal. Ini biasanya terjadi pada penerima transplantasi organ; pada pasien dengan leukemia, limfoma, humoral, atau cacat Leukocyte; atau setelah terapi steroid berkepanjangan.

Diagnosis

Diagnosis   dengan Gram stain, pewarnaan tahan asam, dan kultur organisme dari spesimen dahak, bronchoscopic ( cuci, sikat), aspirasi dari abses, atau dengan biopsi.

Perawatan

  Terapi dengan trimetoprim-sulfametoksazol memerlukan waktu panjang (sampai 1 tahun)

diagnosis Tuberkulosis

Tuberkulosis didiagnosis dengan menemukan Mycobacterium bakteri tuberculosis dalam spesimen klinis yang diambil dari pasien.

Diagnosis

Sebuah evaluasi medis yang lengkap untuk tuberkulosis (TB) harus mencakup riwayat medis, pemeriksaan fisik, sinar-X dada dan pemeriksaan mikrobiologis (dari sputum atau beberapa sampel lain yang sesuai), juga tes kulit tuberkulin , scan dan sinar-X, biopsi bedah perlu dilakukan untuk menunjang diagnosis.

Studi Mikrobiologi

Diagnosis definitif TB hanya dapat dilakukan dengan mengkultur organisme Mycobacterium tuberculosis dari spesimen yang diambil dari pasien (paling sering dahak , namun bisa juga nanah, CSF , biopsi jaringan, dll) [1] . diagnosis yang dibuat selain biakan hanya dapat diklasifikasikan sebagai "kemungkinan" atau "dianggap".

Dahak

Apusan dahak harus dilakukan untuk jika pasien memproduksi dahak . Metode yang disarankan untuk ini adalah mikroskop fluoresensi (pewarnaan auramine-rhodamine ) yang lebih sensitif dibandingkan Ziehl-Neelsen konvensional. Dalam kasus dimana tidak ada produksi dahak spontan, sampel dapat diinduksi, biasanya dengan inhalasi nebulized dari suatu garam atau salin memakai bronkodilator. Sebuah studi perbandingan menemukan bahwa tiga sampel dahak lebih sensitif dari pada tiga bilasan lambung.

Sampling Alternatif

Pada pasien yang tak mampu menghasilkan sputum, sampel alternatif untuk mendiagnosa TB paru adalah bilasan lambung, usap laring , bronkoskopi (dengan lavage bronchoalveolar, bilasan bronkus, dan / atau transbronchial biopsi ), dan aspirasi jarum halus (transtracheal atau transbronchial). Dalam beberapa kasus, diperlukan teknik yang lebih invasif , termasuk biopsi jaringan selama mediastinoscopy atau thoracoscopy .

PCR

Jika BTA positif, PCR atau tes gen probe dapat membedakan M. tuberkulosis dari mikobakteri lain.

Lainnya

Secara tradisional, menggunakan media Lowenstein-Jensen (LJ), Kirchner, atau Middlebrook (7H9, 7H10, dan 7H11). Biakan Basil Tahan Asam (BTA) bisa membedakan berbagai bentuk mikobakteri, walaupun hasilnya butuh waktu empat sampai delapan minggu . Sistem baru, otomatis dan lebih cepat menggunakan MB / BacT, BACTEC 9000, dan Indikator Pertumbuhan mikobakteri Tube (MGIT).

Radiografi

Chest X-ray

Tuberkulosis menciptakan rongga yang terlihat di x-ray seperti ini, di kanan atas lobus pasien tersebut.

Pada TB infiltrat paru aktif atau konsolidasi dan / atau sering terlihat rongga di atas paru-paru dengan atau tanpa hilar limfadenopati mediastinum atau efusi pleura (pleurisy TB). Lesi dapat muncul di mana saja di paru-paru. Dalam TB yang sudah meluas umumnya terlihat pola nodul kecil di seluruh bidang paru-paru - disebut TB milier.

Kelainan pada radiografi dada tidak bisa memastikan diagnostik TB, namun, radiografi dada dapat digunakan untuk menyingkirkan kemungkinan TB paru pada orang yang memiliki reaksi positif terhadap tes kulit tuberkulin dan tidak ada gejala penyakit.

Kavitasi atau konsolidasi dari apexes dari lobus atas paru-paru dapat dilihat dengan x-ray dada

Radiofarmasi

Radiofarmasi memainkan peran penting dalam Kedokteran Nuklir. Hampir 95% dari radiofarmasi digunakan untuk tujuan diagnostik seperti 99mTc-INH, 133-Xe ,131-I, dan 111-In . Dengan menggunakan radiotracers tersebut, penyakit tidak hanya bisa terdeteksi tetapi juga organ pada hewan dan manusia . Metodologi ini telah berhasil diterapkan dalam uji klinis untuk diagnosis awal tuberculosis.

tes kulit Tuberkulin (PPD)

Dua metode tes yang tersedia: tes Mantoux dan Heaf.

tes kulit Mantoux

Test Mantoux untuk TB dilakukan dengan menyuntikkan PPD (Purified Protein Derivatif) tuberkulin secara intradermal dan mengukur ukuran indurasi 48-72 jam kemudian.
Jika seseorang telah memiliki sejarah tes kulit tuberkulin positif, tes kulit yang lain tidak diperlukan.

test Heaf


Tes Heaf pernah digunakan di Britania Raya sampai tahun 2005, kini digunakan.
Mantoux .

Tingkat uji Mantoux positif setara dengan 10 TU (0,1 ml 100 TU / ml, 1:1000) adalah Indurasi 0-4 mm (Heaf 0 hingga 1), 5-14 mm indurasi (Heaf 2) ; indurasi lebih besar dari 15 mm (Heaf 3 sampai 5)

Reaksi tuberkulin klasifikasi CDC

Suatu indurasi (daerah kulit mengeras, menonjol) lebih dari 5-15 mm (tergantung pada faktor-faktor risiko seseorang) untuk 10 unit Mantoux dianggap hasil yang positif, menunjukkan infeksi TB.

5 mm atau lebih positif pada penderita HIV-positif , Kontak TB baru,
Orang dengan perubahan nodular atau fibrosis pada ronsen dada menandakan TB yang lama sembuh, Pasien dengan transplantasi organ dan pasien imunosupresi lainnya

10 mm atau lebih positif pada orang yang tinggal di daerah endemis (kurang dari 5 tahun)
Pengguna narkoba suntikan. Warga dan karyawan berisiko tinggi (misalnya, penjara, panti jompo, rumah sakit, tempat penampungan tunawisma, dll) Mycobacteriology personil laboratorium. Orang dengan kondisi klinis yang berisiko tinggi (misalnya, diabetes , lama kortikosteroid terapi, leukemia , stadium akhir penyakit ginjal , kronis malabsorpsi sindrom, berat badan rendah, dll) Anak-anak kurang dari 4 tahun, atau anak-anak dan remaja terpapar dewasa dalam kategori berisiko tinggi

15 mm atau lebih positif pada Orang-orang dengan tidak ada faktor risiko untuk TB
(Catatan: program tes kulit yang ditargetkan hanya dilakukan antar kelompok berisiko tinggi)

Sebuah tes tuberkulin konversi didefinisikan sebagai peningkatan dari 10 mm atau lebih dalam jangka waktu 2 tahun, tanpa memandang usia.


Laboratorium


Adenosin deaminase

Pada tahun 2007, tinjauan sistematis adenosin deaminase oleh Teknologi Kesehatan NHS menyimpulkan "Tidak ada bukti untuk mendukung penggunaan uji ADA untuk diagnosis TB paru. Namun, ada bukti yang cukup untuk mendukung penggunaannya dalam sampel cairan pleura untuk diagnosis TB pleura, sensitivitasnya sangat tinggi, dan untuk tingkat yang sedikit lebih rendah untuk meningitis TB,. Dalam pleura TB dan meningitis TB, tes ADA memiliki sensitivitas yang lebih tinggi daripada tes lainnya ". [12]

tes amplifikasi asam nukleat (NAAT)

Tes yang menggunakan teknik reaksi rantai polimerase (PCR) untuk mendeteksi asam nukleat mikobakteri.. Ada dua tes yang tersedia secara komersial, yang paling umum adalah Uji langsung mycobacterium TB (MTD, Gen-Probe) dan Amplicor (Roche Diagnostics). "uji akurasi NAAT akan jauh lebih unggul bila diterapkan pada sampel pernafasan. . Meskipun hasilnya tidak signifikan secara statistik, pengujian AMTD muncul untuk melakukan lebih baik dari tes komersial lainnya yang tersedia saat ini ".

Penelitian ini menemukan keakuratan tes MTD sebagai berikut:
spesifisitas 99%

pasien BTA positif
sensitivitas 99%
spesifisitas 98%

pasien BTA negatif
sensitivitas 62%
spesifisitas 99%

Hematologi

Meskipun tidak pernah diagnostik, anemia normositik dan limfopenia adalah umum., neutrophilia jarang ditemukan. [Anemia kekurangan zat besi dapat terjadi karena pengobatan isoniazid ] Urea dan elektrolit biasanya normal, meskipun hypocalcemia dan hiponatremia mungkin muncul pada meningoencephalitis TB karena SIADH . Pada penyakit lanjut, hipoalbuminemia , hyperproteinemia , dan hyperglobulinemia mungkin ada. [14]
Tingkat sedimentasi eritrosit (LED) biasanya meningkat


tes γ Interferon

Tes Interferon-γ (interferon-gamma) atau IGRAs adalah perkembangan baru yang menarik dalam pengujian infeksi TB. IGRAs didasarkan pada kemampuan antigen Mycobacterium tuberculosis untuk sekretori awal antigen target 6 (ESAT-6) dan filtrat protein 10 (CFP-10) untuk merangsang produksi interferon-gamma host. Karena antigen ini tidak terdapat dalam mikobakteri non-TB atau dalam setiap varian vaksin BCG, maka tes ini dapat membedakan infeksi laten TB (LTBI).

Tes darah Quantiferon-TB dan T-SPOT. TB menggunakan antigen untuk mendeteksi orang dengan TB. Limfosit dari darah pasien diinkubasi dengan antigen. Jika pasien telah terkena TBC sebelumnya, T limfosit menghasilkan interferon γ. TB Gold Quantiferon menggunakan format ELISA untuk mendeteksi seluruh produksi γ interferon darah dengan sensitivitas yang besar (89%). Perbedaan antara pengujian adalah bahwa Quantiferon-TB Gold menentukan jumlah interferon γ ketika darah keseluruhan terkena antigen (ESAT-6, CFP-10 dan TB 7.7 (p4)), sedangkan Pedoman untuk penggunaan yang disetujui FDA Quantiferon-TB Gold yang dirilis oleh CDC pada Desember 2005. Pada bulan Oktober 2007, FDA memberikan persetujuan Gold Quantiferon-TB untuk digunakan di Amerika Serikat.

Immunospot assay-enzim (ELISPOT) merupakan tes darah yang tersedia di Inggris yang dapat menggantikan tes kulit untuk diagnosis . T-SPOT.TB , ELISPOT assay, menghitung jumlah limfosit T aktif yang mengeluarkan γ interferon.


Menurut studi dari Korea, di mana ada prevalensi tinggi LTBI, Quantiferon-TB Gold dan T-SPOT.TB memiliki kepekaan yang baik tetapi spesifisitas berkurang untuk mendiagnosis TB aktif, karena kemampuan mereka untuk mendeteksi TB laten.

Ketika seseorang didiagnosis dengan tuberkulosis, semua kontak dekat mereka harus diskrining untuk TB dengan tes kulit tuberkulin atau dada x-ray atau keduanya.


TEHNIK PEMERIKSAAN

PENGECATAN TAHAN ASAM

Pengecatan Tahan Asam adalah suatu teknik yang membedakan spesies Mycobacterium dari bakteri lain. Nocardia spesies juga bisa dikategorikan sebagai mikroorganisme  "Tahan-Asam."

Organisme Tahan Asam sukar dicat dengan pewarnaan biasa termasuk pewarnaan Gram . Aplikasi pewarnaan Tahan Asam untuk Mycobacterium dapat menggunakan metode Ziehl-Neelson (dengan pemanasan) atau metode Kinyoun (menggunakan pelarut lipid). Sekali tercat, Basil Tahan Asam mampu mempertahankan cat, sedangkan pada bakteri lain yang tidak tahan asam, cat lebih mudah hilang setelah dilunturkan dengan asam-alkohol.  Ciri inilah sehingga mereka disebut   sebagai "Tahan Asam" Kandungan lemak tinggi dari dinding sel Mycobacterium mungkin yang bertanggungjawab terhadap sifat Tahan Asam yang dimilikinya.

Dalam Ziehl-Neelson klasik teknik pengecatan tahan asam  dilakukan seperti berikut: sediaan/smear dituangi pewarna  carbol-fuchsin, dipanaskan,   dilunturkan/decolorized, terakhir dituangi counterstained     (methylene biru).    Organisme yang Tahan Asam akan berwarna merah karena dapat mempertahankan pewarna   carbol-fuchsin sedangkan latar belakang dan setiap  organisme yang tidak tahan asam   akan berwarna  biru karena methylene biru  ( counterstain). Metode Kinyoun   serupa dengan  metode Ziehl-Neelson tetapi tidak memerlukan pemanasan karena menggunakan pewarna carbol fuchsin dengan konsentrasi yang lebih tinggi 

Metode ketiga pengecatan Tahan Asam   adalah pengecatan fluorochrome   yang menggunakan auramine, suatu fluorescent dye. Pengecatan ini menggunakan prinsip yang sama seperti di atas   tetapi memerlukan  mikroskop fluorescent untuk bisa melihat hasilnya.

 

Prosedur Metode Ziehl Neelsen  :

1. Tuangi sediaan/smear yang susdah di  fiksasi atau "flamming" dengan cat carbolfuchsin, steam di atas air

     panas/mendidih selama 8 menit atau  dengan panas api selama 5 menit.

    Tambahkan cat jika diperlukan supaya jangan sampai mendidih

2. Sesudah didinginkan, bilas dengan air, kemudian  lakukan decolorisasi dengan menambahkan acid-alkohol 

    selama 15 – 20 detik

3. Bilas dengan air, untuk menghentikan proses decolorisasi  

4. Tambahkan counterstain (methylen blue) selama 30 detik sampai 1 menit

5. Bilas dengan air untuk menghilangkan kelebihan methylen blue pada slide

6. Keringkan sediaan dengan menggunakan kertas hisap, periksa di bawah mikroskop dengan

    menggunakan minyak immersi

Hasil Pengecatan 

Organisme Tahan Asam berwarna merah.

Organisme tidak Tahan Asam dan sel-sel jaringan berwarna biru   

 Catatan :    

 Genus Mycobacterium,   organisme   "rodlike",  . bentuk sel-sel mereka   tidak beraturan,   tidak membentuk spora asli, tetapi pada beberapa jenis plasma sel  terpecah menjadi 3-5 bagian,  sama seperti di actinomycetes.   Mikobakteri adalah   bercabang.   Sel memiliki 1-2 cabang   lateral. Dalam beberapa spesies bercabang jarang ditemui. Setelah inokulasi,  sel rodlike cepat hancur menjadi cocci   (setelah 1-2 hari dan kadang-kadang hanya setelah 10-15 jam). Dalam tahap pertumbuhan ini, mikobakteri sering disangka sebagai  micrococci. Gray dan Thornton (1928) pernah mengira   Mycoplasma sebagai mikobakteri; bentuk  melengkung, bercabang, gram positif tetapi mereka memiliki flagela dan mobile. Demikian pula  Köhler (1955), yang pernah menganggap bahwa Mycoplasma adalah mikobakteri  

Bentuk  Mycobacteria dapat seperti gambar di bawah ini :

a--Mycob. hyalinum; b--Mycob. rubrum; c--Mycob. cyaneum; d--Mycob. bifiidum; d--Mycob. citreum; f--Mycob. filiforme.  ( pembesaran 600 x )